यूनिवर्सल SYBR ग्रीन qपीसीआर प्रीमिक्स (नीला)

कैट नं: HCB5041B

यूनिवर्सल ब्लू क्यूपीसीआर मास्टर मिक्स (डाई आधारित) उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता द्वारा विशेषता 2×वास्तविक समय मात्रात्मक पीसीआर प्रवर्धन के लिए एक पूर्व-समाधान है, इसका रंग नीला है, और इसमें नमूना जोड़ने के ट्रेसिंग का प्रभाव है।मुख्य घटक टाक डीएनए पोलीमरेज़ नमूना तैयार करने के दौरान प्राइमर एनीलिंग के कारण गैर-विशिष्ट प्रवर्धन को प्रभावी ढंग से रोकने के लिए एंटीबॉडी हॉट स्टार्ट का उपयोग करता है।साथ ही, सूत्र पीसीआर प्रतिक्रिया की प्रवर्धन दक्षता में सुधार करने और विभिन्न जीसी सामग्री (30 ~ 70%) के साथ जीन के प्रवर्धन को बराबर करने के लिए बढ़ावा देने वाले कारकों को जोड़ता है, ताकि मात्रात्मक पीसीआर व्यापक मात्रात्मक में एक अच्छा रैखिक संबंध प्राप्त कर सके। क्षेत्र।इस उत्पाद में विशेष आरओएक्स पैसिव रेफरेंस डाई शामिल है, जो अधिकांश क्यूपीसीआर उपकरणों पर लागू होता है।विभिन्न उपकरणों पर ROX की सांद्रता को समायोजित करना आवश्यक नहीं है।प्रवर्धन के लिए प्रतिक्रिया प्रणाली तैयार करने के लिए केवल प्राइमर और टेम्पलेट जोड़ना आवश्यक है।

अवयव

यूनिवर्सल ब्लू क्यूपीसीआर मास्टर मिक्स

जमा करने की अवस्था

उत्पाद को आइस पैक के साथ भेजा जाता है और इसे 18 महीने तक -25℃~-15℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।प्रतिक्रिया प्रणाली का भंडारण या तैयारी करते समय तेज प्रकाश विकिरण से बचना आवश्यक है।

विनिर्देश

निर्देश

1.प्रतिक्रिया प्रणाली

[नोट]: ज़ोरदार झटकों से अत्यधिक बुलबुले से बचने के लिए उपयोग से पहले अच्छी तरह मिलाएं।

ए) प्राइमर सांद्रता: अंतिम प्राइमर सांद्रता 0.2μmol/L है, और इसे उपयुक्त के रूप में 0.1 और 1.0μmol/L के बीच समायोजित भी किया जा सकता है।

बी) टेम्पलेट एकाग्रता: यदि टेम्पलेट अविकृत सीडीएनए स्टॉक समाधान है, तो उपयोग की जाने वाली मात्रा क्यूपीसीआर प्रतिक्रिया की कुल मात्रा के 1/10 से अधिक नहीं होनी चाहिए।

ग) टेम्पलेट कमजोरीकरण: सीडीएनए स्टॉक समाधान को 5-10 गुना पतला करने की सिफारिश की जाती है।जोड़े गए टेम्प्लेट की इष्टतम मात्रा तब बेहतर होती है जब प्रवर्धन द्वारा प्राप्त सीटी मान 20-30 चक्र हो।

घ) प्रतिक्रिया प्रणाली: लक्ष्य जीन प्रवर्धन की प्रभावशीलता और दोहराव सुनिश्चित करने के लिए 20μL या 50μL का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है।

ई) सिस्टम तैयारी: कृपया सुपर क्लीन बेंच में तैयारी करें और न्यूक्लीज अवशेषों के बिना युक्तियों और प्रतिक्रिया ट्यूबों का उपयोग करें;फ़िल्टर कार्ट्रिज के साथ युक्तियों का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है।परस्पर संदूषण और एयरोसोल संदूषण से बचें।

2.प्रतिक्रिया कार्यक्रम

मानक कार्यक्रम

त्वरित कार्यक्रम

[नोट]: तेज़ कार्यक्रम अधिकांश जीनों के लिए उपयुक्त है, और मानक कार्यक्रमों को व्यक्तिगत जटिल माध्यमिक संरचना जीनों के लिए आज़माया जा सकता है।

ए) एनीलिंग तापमान और समय: कृपया प्राइमर और लक्ष्य जीन की लंबाई के अनुसार समायोजित करें।

बी) प्रतिदीप्ति संकेत अधिग्रहण (★): कृपया उपकरण के उपयोग के निर्देशों में आवश्यकताओं के अनुसार प्रयोगात्मक प्रक्रिया निर्धारित करें।

ग) मेल्टिंग कर्व: उपकरण डिफ़ॉल्ट प्रोग्राम का उपयोग सामान्य रूप से किया जा सकता है।

3. परिणाम विश्लेषण 

मात्रात्मक प्रयोगों के लिए न्यूनतम तीन जैविक प्रतिकृतियों की आवश्यकता थी।प्रतिक्रिया के बाद, प्रवर्धन वक्र और पिघलने वक्र की पुष्टि की जानी चाहिए।

3.1 प्रवर्धन वक्र:

मानक प्रवर्धन वक्र S-आकार का है।मात्रात्मक विश्लेषण सबसे सटीक होता है जब सीटी मान 20 और 30 के बीच आता है। यदि सीटी मान 10 से कम है, तो टेम्पलेट को पतला करना और परीक्षण फिर से करना आवश्यक है।जब सीटी मान 30-35 के बीच होता है, तो टेम्पलेट एकाग्रता या प्रतिक्रिया प्रणाली की मात्रा को बढ़ाना आवश्यक होता है, ताकि प्रवर्धन दक्षता में सुधार हो और परिणाम विश्लेषण की सटीकता सुनिश्चित हो सके।जब सीटी मान 35 से अधिक होता है, तो परीक्षण के परिणाम जीन की अभिव्यक्ति का मात्रात्मक विश्लेषण नहीं कर सकते हैं, लेकिन गुणात्मक विश्लेषण के लिए इसका उपयोग किया जा सकता है।

3.2 पिघलने का वक्र:

पिघलने की अवस्था का एकल शिखर इंगित करता है कि प्रतिक्रिया विशिष्टता अच्छी है और मात्रात्मक विश्लेषण किया जा सकता है;यदि पिघलने का वक्र दोहरी या एकाधिक चोटियाँ दिखाता है, तो मात्रात्मक विश्लेषण नहीं किया जा सकता है।पिघलने वाला वक्र दोहरी चोटियों को दर्शाता है, और यह निर्धारित करना आवश्यक है कि क्या गैर-लक्ष्य शिखर प्राइमर डिमर है या डीएनए एगरोज़ जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा गैर-विशिष्ट प्रवर्धन है।यदि यह प्राइमर डिमर है, तो प्राइमर एकाग्रता को कम करने या उच्च प्रवर्धन दक्षता वाले प्राइमरों को फिर से डिज़ाइन करने की अनुशंसा की जाती है।यदि यह गैर-विशिष्ट प्रवर्धन है, तो कृपया एनीलिंग तापमान बढ़ाएँ, या प्राइमरों को विशिष्टता के साथ फिर से डिज़ाइन करें।

टिप्पणियाँ

कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक पीपीई, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें!

यह प्रॉडक्ट केवल शोध के उपयोग के लिए है!