मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर प्रीमिक्स-यूएनजी
कैट नं: HCB5145A
मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर जांच किट (यूडीजी प्लस) टेम्पलेट के रूप में आरएनए पर आधारित एक मल्टीप्लेक्स मात्रात्मक पीसीआर किट है।प्रयोग की प्रक्रिया में, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और मात्रात्मक पीसीआर को एक ही ट्यूब में किया गया, जिससे प्रायोगिक संचालन सरल हो गया और संदूषण का खतरा कम हो गया।इस किट में, पहले स्ट्रैंड सीडीएनए को गर्मी प्रतिरोधी रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस द्वारा कुशलतापूर्वक संश्लेषित किया गया था और हॉटस्टार्ट टैग डीएनए पॉलीमरेज़ द्वारा मात्रात्मक रूप से बढ़ाया गया था।किट में मुख्य रूप से अनुकूलित एमपी बफर, एंजाइम मिश्रण आदि शामिल हैं। बफर समाधान में पहले से ही एमजी शामिल है2+और डीएनटीपी.इसके अलावा, ऐसे कारक जोड़े जाते हैं जो गैर-विशिष्ट पीसीआर प्रवर्धन को प्रभावी ढंग से रोक सकते हैं और कई क्यूपीसीआर प्रतिक्रियाओं की प्रवर्धन दक्षता में सुधार कर सकते हैं, जो प्रवर्धन दक्षता सुनिश्चित कर सकते हैं और कई प्रवर्धन प्रतिक्रिया तक ले जा सकते हैं।एयरोसोल संदूषण के जोखिम को प्रभावी ढंग से रोकने के लिए डीयूटीपी/यूडीजी प्रणाली को जोड़ा गया था।
अवयव
1. बफर
2. एंजाइम मिश्रण
विनिर्देश
ठोस शुरुआत | बिल्ट-इन हॉट स्टार्ट |
पता लगाने की विधि | प्राइमर-जांच का पता लगाना |
पीसीआर विधि | एक कदम आरटी-क्यूपीसीआर |
पोलीमर्स | टाक डीएनए पोलीमरेज़ |
नमूने का प्रकार | डीएनए |
जमा करने की अवस्था
उत्पाद को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इसे 1 वर्ष के लिए -25~-15℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।इससे बार-बार बचना चाहिएजमना-पिघलना।इसे अलग से सहेजने की अनुशंसा की जाती है.
निर्देश
1.प्रतिक्रिया प्रणाली
अवयव | आयतन (μL) | अंतिम एकाग्रता |
2 × एमपी बफर | 12.5 | 1× |
एंजाइम मिश्रण | 1 | - |
प्राइमर/जांच मिश्रण (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
टेम्पलेट आरएनए | 1-10 | - |
RNase मुक्त H2O | से 25 | - |
टिप्पणियाँ:
उपयोग से पहले अच्छी तरह से मिश्रण करना सुनिश्चित करें, हिंसक कंपन के कारण होने वाले अत्यधिक बुलबुले से बचें।
एक।प्राइमर सांद्रता: मल्टीप्लेक्स प्राइमर सहित प्राइमर मिश्रण, स्थिति के आधार पर इष्टतम प्राइमर सांद्रता 0.l और 1.0μM के बीच हो सकती है।
बी।जांच एकाग्रता: मल्टीप्लेक्स जांच लेबलिंग अंतर फ्लोरोसेंट समूह सहित जांच मिश्रण, स्थिति के आधार पर इष्टतम जांच एकाग्रता 0.05 और 0.5μM के बीच हो सकती है।
सी।टेम्प्लेट पतला करना: क्यूपीसीआर अत्यधिक संवेदनशील है और इसे टेम्प्लेट पतला करने की अनुशंसा की जाती है।नियंत्रण सीटी मान 20 और 35 के बीच उपयुक्त है।
डी।सिस्टम की तैयारी: कृपया अल्ट्रा क्लीन वर्किंग टेबल, और पिपेटर और रिएक्शन ट्यूब को न्यूक्लीज अवशेष के बिना तैयार करें;फ़िल्टर तत्व के साथ गन हेड का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है।परस्पर संदूषण और एयरोसोल संदूषण से बचें।
2. अनुकूलित साइकिलिंगशिष्टाचार
चक्र कदम | अस्थायी. | समय | साइकिल |
रिवर्स प्रतिलेखन | 50℃ए | 20 मिनट | 1 |
प्रारंभिक-विकृतीकरण | 95℃ | 5 मिनट | 1 |
प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95℃ | 15 सेकंड |
40-45 |
60℃ b | 30 सेकंड c |
टिप्पणियाँ:
एक।रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन: तापमान 42°C या 50°C का चयन कर सकता है।
बी।प्रवर्धन प्रतिक्रिया: तापमान को डिज़ाइन किए गए प्राइमरों के टीएम मान के अनुसार समायोजित किया जाता है।
सी।प्रतिदीप्ति संकेत अधिग्रहण: कृपया उपकरण मैनुअल की आवश्यकताओं के अनुसार प्रयोगात्मक प्रक्रिया निर्धारित करें।
टिप्पणियाँ
कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक पीपीई, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें।