अल्ट्रा न्यूक्लिज़ जीएमपी-ग्रेड
कैट नंबर: HC2016A
अल्ट्रान्यूक्लिज़ जीएमपी-ग्रेड को जीएमपी वातावरण के तहत आनुवंशिक रूप से इंजीनियर और तैयार करके एस्चेरिचिया कोली (ई.कोली) में व्यक्त और शुद्ध किया जाता है।यह वैज्ञानिक अनुसंधान में सेल सतह पर तैरनेवाला और सेल लाइसेट की चिपचिपाहट को कम कर सकता है, प्रोटीन शुद्धिकरण दक्षता बढ़ा सकता है और प्रोटीन कार्यात्मक अनुसंधान को बढ़ा सकता है।उत्पाद मेजबान न्यूक्लिक एसिड अवशेषों को पीजी-ग्रेड तक कम कर सकता है, जिससे वायरस शुद्धिकरण, वैक्सीन निर्माण और प्रोटीन/पॉलीसेकेराइड फार्मास्युटिकल विनिर्माण सहित अनुप्रयोगों के जैविक उत्पादों के प्रदर्शन और सुरक्षा में सुधार हो सकता है।इसके अलावा, उत्पाद को सेल थेरेपी और वैक्सीन विकास में मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (पीबीएमसी) के एकत्रीकरण को रोकने के लिए भी लागू किया जा सकता है।
अल्ट्रान्यूक्लिज़ एक रंगहीन, पारदर्शी तरल की उपस्थिति के साथ, बफर (20 मिमी ट्रिस-एचसीएल पीएच 8.0, 2 मिमी एमजीसीएल, 20 मिमी NaCl, 50% ग्लिसरीन) में निस्पंदित एक निष्फल अभिकर्मक के रूप में प्रदान किया जाता है।यह उत्पाद जीएमपी प्रक्रिया आवश्यकताओं के अनुसार निर्मित होता है और तरल रूप में प्रदान किया जाता है।
अवयव
अल्ट्रान्यूक्लिज़ जीएमपी-ग्रेड (250 यू/μL)
जमा करने की अवस्था
उत्पाद को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इसे दो साल तक -25℃~-15°C पर संग्रहीत किया जा सकता है।
यदि उत्पाद खोला गया है और एक सप्ताह से अधिक समय तक 4℃ पर संग्रहीत किया गया है, तो हम फ़िल्टर करने की सलाह देते हैंमाइक्रोबियल संदूषण को रोकने के लिए उत्पाद।
विशेष विवरण
| अभिव्यक्ति होस्ट | अल्ट्रान्यूक्लिज़ जीन के साथ पुनः संयोजक ई. कोलाई |
| आणविक वजन | 26.5 केडीए |
| सोइलेक्ट्रिक पॉइंट | 6.85 |
| पवित्रता | ≥99% (एसडीएस-पेज) |
| भंडारण बफ़र | 20 मिमी ट्रिस-एचसीएल पीएच 8.0, 2 मिमी एमजीसीएल, 20 मिमी NaCl, 50% ग्लिसरीन |
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इकाई परिभाषा | एक गतिविधि इकाई (यू) की परिभाषा उपयोग किए जाने वाले एंजाइम की मात्रा है2. 625 एमएल में 30 मिनट में ΔA260 के अवशोषण मान को 1.0 से बदलें8.0 के पीएच के साथ 37℃ पर प्रतिक्रिया प्रणाली (पूर्ण पाचन के बराबर)।ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स में 37 μg सैल्मन शुक्राणु डीएनए)। |
निर्देश
1. नमूना संग्रह
अनुवर्ती कोशिकाएँ: माध्यम को हटा दें, कोशिकाओं को पीबीएस से धो लें, और सतह पर तैरनेवाला हटा दें।
सस्पेंशन कोशिकाएं: सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा कोशिकाओं को इकट्ठा करें, कोशिकाओं को पीबीएस से धोएं, 6,000 पर सेंट्रीफ्यूज करें10 मिनट के लिए आरपीएम, गोली इकट्ठा करें।
एस्चेरिचिया कोली: सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा बैक्टीरिया इकट्ठा करें, पीबीएस से एक बार धोएं, 8,000 पर सेंट्रीफ्यूज करें5 मिनट के लिए आरपीएम, और गोली इकट्ठा करें।
2. नमूना उपचार
एकत्रित कोशिका छर्रों को द्रव्यमान (जी) से आयतन (एमएल)1:(10-20) के अनुपात में लिसिस बफर के साथ, या बर्फ पर या कमरे के तापमान पर यांत्रिक या रासायनिक तरीकों से उपचारित करें (सेल गोली के 1 ग्राम में लगभग होता है)
109 सेल)।
3. एंजाइम उपचार
प्रतिक्रिया प्रणाली में 1-5mM MgCl जोड़ें और pH को 8-9 पर समायोजित करें।
1 ग्राम सेल छर्रों को पचाने के लिए 250 इकाइयों के अनुपात के अनुसार अल्ट्रान्यूक्लिज़ जोड़ें, 30 मिनट से अधिक समय तक 37℃ पर सेते रहें।कृपया चुनने के लिए "अनुशंसित प्रतिक्रिया समय" फॉर्म देखेंउपचार की अवधि.
4. सतह पर तैरनेवाला संग्रह
30 मिनट के लिए 12,000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज करें और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें।
नोट: यदि घोल अम्लीय या क्षारीय है, या इसमें नमक, डिटर्जेंट आदि की उच्च सांद्रता हैडिनाटुरेंट्स, कृपया एंजाइम की खुराक बढ़ाएँ या तदनुसार उपचार का समय बढ़ाएँ।
अनुशंसित प्रतिक्रिया स्थितिऑन्स
| पैरामीटर | इष्टतम स्थिति | प्रभावी कंडिशनर |
| एमजी²+एकाग्रता | 1-5 मिमी | 1-10 मिमी |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| तापमान | 37℃ | 0-42℃ |
| डीटीटी एकाग्रता | 0-100 मिमी | >0 एमएम |
| मर्कैप्टोएथेनॉल एकाग्रता | 0-100 मिमी | >0 एमएम |
| मोनोवैलेंट धनायन एकाग्रता | 0-20 मिमी | 0-150 मिमी |
| फॉस्फेट लोन सांद्रण | 0-10 मिमी | 0-100 मिमी |
अनुशंसित प्रतिक्रिया समय (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| अल्ट्रान्यूक्लिज़ मात्रा (अंतिम एकाग्रता) | समय की प्रतिक्रिया |
| 0.25 यू/एमएल | >10 घंटे |
| 2.5 यू/एमएल | >4 घंटे |
| 25 यू/एमएल | 30 मिनट |
टिप्पणियाँ:
कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक पीपीई, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें!
