एक कदम आरटी-क्यूपीसीआर एसवाईबीआर ग्रीन प्रीमिक्स
कैट नं: HCB5140A
वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर साइबर ग्रीन प्रीमिक्स एसवाईबीआर ग्रीन आई डाई पर आधारित प्रतिदीप्ति मात्रा निर्धारण के लिए है।जीन-विशिष्ट प्राइमरों का उपयोग करके, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और क्यूपीसीआर प्रतिक्रियाएं एक ट्यूब में पूरी की जाती हैं, जिससे बार-बार कैप खोलने और पाइपिंग ऑपरेशन की आवश्यकता समाप्त हो जाती है, परख दक्षता में काफी सुधार होता है और संदूषण का खतरा कम हो जाता है।आरएनए नमूनों के लिए, किट कुशल सीडीएनए संश्लेषण के लिए गर्मी प्रतिरोधी रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस और मात्रात्मक प्रवर्धन के लिए हॉटस्टार्ट टैक डीएनए पॉलीमरेज़ का उपयोग करती है।अनुकूलित बफर सिस्टम के तहत, किट की संवेदनशीलता अत्यधिक व्यक्त लक्ष्यों के लिए 0.1 पीजी तक और मध्यम रूप से व्यक्त लक्ष्यों के लिए 1 पीजी तक हो सकती है।यह किट डीएनए नमूनों के प्रवर्धन और परिमाणीकरण के लिए उपयुक्त है।यह विभिन्न पौधों और जानवरों के नमूनों, कोशिकाओं और सूक्ष्मजीवों से न्यूक्लिक एसिड का संवेदनशील पता लगाने और मात्रा निर्धारित करने में सक्षम बनाता है।
अवयव
| No | नाम | आयतन | आयतन |
| 1 | उन्नत बफ़र | 250 μL | 2×1.25 एमएल |
| 2 | उन्नत एंजाइम मिश्रण | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase फ्री एच2O | 250 μL | 2×1.25 एमएल |
जमा करने की अवस्था
इस उत्पाद को 1 वर्ष तक प्रकाश से -25~-15℃ दूर संग्रहित किया जाना चाहिए।
निर्देश
1.रिएक्शन सिस्टम कॉन्फ़िगरेशनd
| अवयव | आयतन (μL) | आयतन (μL) | अंतिम एकाग्रता |
| उन्नत बफ़र | 12.5 | 25 | 1× |
| उन्नत एंजाइम मिश्रण | 1 | 2 | - |
| फॉरवर्ड प्राइमर (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| रिवर्स प्राइमर (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| आरएनए टैम्प्लेटb | X | X | - |
| RNase फ्री एच2हेc | से 25 | से 50 | - |
टिप्पणियाँ:
1)ए.टीअंतिम प्राइमर सांद्रता 0.2 μmol/L थी, जिसे उचित होने पर 0.1 और 1μmol/L के बीच भी समायोजित किया जा सकता था।
2) बी.अभिकर्मक अत्यंत संवेदनशील है, कुल आरएनए 1pg-1μg की सीमा में है, और मानव नमूनों के परीक्षण से 1 pg-100 एनजी का इष्टतम इनपुट पता चला है, जो उपयुक्त के रूप में 15-30 की सीमा में समग्र सीटी मान को नियंत्रित करता है।
3) सी.लक्ष्य जीन प्रवर्धन की वैधता और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता सुनिश्चित करने के लिए 20μL या 50μL का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है।
4)डी.कृपया अल्ट्रा-क्लीन बेंच में तैयारी करें और न्यूक्लीज अवशेष-मुक्त युक्तियों और प्रतिक्रिया ट्यूबों का उपयोग करें;फ़िल्टर कार्ट्रिज युक्त युक्तियों की अनुशंसा की जाती है।परस्पर संदूषण और एयरोसोल संदूषण से बचें।
2.प्रतिक्रिया कार्यक्रम
| साइकिल कदम | अस्थायी. | समय | साइकिल |
| रिवर्स प्रतिलेखन | 50℃a | 6 मिनट | 1 |
| प्रारंभिक विकृतीकरण | 95℃ | 5 मिनट | 1 |
| प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95℃ | 15 सेकंड | 40 |
| 60℃b | 30 सेकंड | ||
| पिघलने की अवस्था चरण | उपकरण डिफ़ॉल्ट | 1 | |
टिप्पणियाँ:
1)ए.प्रायोगिक आवश्यकताओं के अनुसार रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन तापमान 50-55°C के बीच चुना जा सकता है।डीएनए नमूनों के लिए, रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन प्रक्रिया को छोड़ा जा सकता है।
2) बी.विशेष मामलों में एनीलिंग/विस्तार तापमान को प्राइमर टीएम मान के अनुसार समायोजित किया जा सकता है, 60 डिग्री सेल्सियस की सिफारिश की जाती है।
टिप्पणियाँ
1. यह उत्पाद केवल शोध उपयोग के लिए है।
2. कृपया अपनी सुरक्षा के लिए लैब कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनकर काम करें।
