5×नियोस्क्रिप्ट फास्ट आरटी-क्यूपीसीआर प्रीमिक्स प्लस-यूएनजी

कैट नं: HCB5142A

नियोस्क्रिप्ट फास्ट आरटी प्रीमिक्स-यूएनजी (प्रोब क्यूआरटी-पीसीआर) एक अत्यधिक स्थिर एक-ट्यूब जांच-आधारित मिश्रण है जो एक-चरण रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन और मात्रात्मक पीसीआर (क्यूआरटी-पीसीआर) के लिए उपयुक्त है।यह प्राइमरों और जांचों के पूर्व-मिश्रण का समर्थन करता है और कम तापमान पर लंबे समय तक भंडारण के बाद स्थिर रहता है।परीक्षण किए जाने वाले नमूने को अतिरिक्त ट्यूब खोलने/पिपेटिंग ऑपरेशन के बिना, उपयोग करते समय सीधे जोड़ा जा सकता है।यह उत्पाद घटक प्रदान करता है, जैसे हॉट-स्टार्ट डीएनए पोलीमरेज़, एम-एमएलवी, हीट-लेबाइल यूरैसिल डीएनए ग्लाइकोसिलेज (टीएस-यूएनजी), आरएनेज इनहिबिटर, एमजीसीएल₂, dNTPs (dTTP के बजाय dUTP के साथ), और स्टेबलाइजर्स।आनुवंशिक रूप से संशोधित तीव्र प्रवर्धन रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस और डीएनए पोलीमरेज़ के साथ, पीसीआर प्रवर्धन को 20-40 मिनट के भीतर पूरा करना संभव है।यह अभिकर्मक एंटी-इनहिबिटरी एम्प्लीफिकेशन एंजाइम और यूएनजी एंजाइम के मिश्रित एंजाइमों के साथ क्यूपीसीआर के लिए विशेष बफर का उपयोग करता है।इसलिए, यह लक्ष्य जीन का अच्छा प्रवर्धन प्राप्त कर सकता है और पीसीआर अवशिष्ट और एयरोसोल प्रदूषण के कारण होने वाले गलत प्रवर्धन को रोक सकता है।यह अभिकर्मक एप्लाइड बायोसिस्टम्स, एपेंडॉर्फ, बायो-रेड और रोश जैसे निर्माताओं के अधिकांश प्रतिदीप्ति मात्रात्मक पीसीआर उपकरणों के साथ संगत है।

अवयव

1.25×नियोस्क्रिप्ट फास्ट RTase/UNG मिक्स

2.5×नियोस्क्रिप्ट फास्ट आरटी प्रीमिक्स बफर (डीयूटीपी)

जमा करने की अवस्था

सभी घटकों को दीर्घकालिक भंडारण के लिए -20℃ और 3 महीने तक के लिए 4℃ पर रखा जाना चाहिए।कृपया पिघलने के बाद अच्छी तरह मिलाएं और उपयोग करने से पहले सेंट्रीफ्यूज करें।बार-बार जमने-पिघलने से बचें।

क्यूआरटी-पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली की तैयारी

1) a.प्राइमर की अंतिम सांद्रता आमतौर पर 0.2μM होती है।बेहतर परिणामों के लिए, प्राइमर सांद्रता को 0.2-1μM की सीमा के भीतर अनुकूलित किया जा सकता है।आम तौर पर, जांच एकाग्रता को 0.1-0.3μM की सीमा के भीतर अनुकूलित किया जा सकता है।

2) बी. तेज पीसीआर प्रक्रिया का उपयोग करते समय, प्राइमर और जांच की एकाग्रता बढ़ाने से बेहतर प्रवर्धन परिणाम हो सकते हैं, और उनके अनुपात को तदनुसार अनुकूलित किया जाना चाहिए।

3) विभिन्न प्रकार के नमूनों में अवरोधक के विभिन्न प्रकार और सामग्री और लक्ष्य जीन की प्रतिलिपि संख्या होती है।नमूना मात्रा को वास्तविक स्थिति के अनुसार माना जाना चाहिए।यदि आवश्यक हो, तो नमूने को न्यूक्लीज़-मुक्त पानी या टीई बफर से पतला करें।

प्रतिक्रिया सीशर्तें

गुणवत्ता नियंत्रण

1.फ़ंक्शन का पता लगाना: क्यूपीसीआर की संवेदनशीलता, विशिष्टता और दोहराव।

2.कोई बहिर्जात न्यूक्लिअस गतिविधि नहीं: कोई बहिर्जात एंडोन्यूक्लिज़ और एक्सोन्यूक्लिज़ प्रदूषण नहीं।

टिप्पणियाँ

1.तीव्र डीएनए पोलीमरेज़ की प्रवर्धन दर 1kb/10s से कम नहीं है।विभिन्न पीसीआर उपकरणों में अलग-अलग ताप और शीतलन गति, तापमान नियंत्रण मोड और तापीय चालकता होती है, और इस प्रकार आपके विशिष्ट तेज़ पीसीआर उपकरण के साथ संयोजन में आपके प्राइमर/जांच एकाग्रता और चलने की विधि का अनुकूलन आवश्यक है।

2.यह उत्पाद व्यापक प्रयोज्यता प्रदर्शित करता है, और यह उच्च-संवेदनशीलता आणविक निदान के लिए उपयुक्त है।कम एनीलिंग तापमान वाले प्राइमरों के लिए या 200 बीपी से अधिक लंबे टुकड़ों के प्रवर्धन के लिए तीन-चरण पीसीआर विधि की सिफारिश की जाती है।

3.चूँकि अलग-अलग एम्प्लिकॉन में dUTP की अलग-अलग उपयोग दक्षता और UNG के प्रति अलग-अलग संवेदनशीलता होती है, इसलिए यदि UNG प्रणाली का उपयोग करते समय पता लगाने की संवेदनशीलता कम हो जाती है, तो अभिकर्मकों को अनुकूलित किया जाना चाहिए।यदि आवश्यक हो तो तकनीकी सहायता के लिए कृपया हमसे संपर्क करें।

4.कैरीओवर पीसीआर उत्पादों के प्रवर्धन से बचने के लिए, प्रवर्धन के लिए समर्पित प्रयोगात्मक क्षेत्र और पिपेट की आवश्यकता होती है।दस्ताने पहनकर काम करें और बार-बार बदलें और एम्प्लीफिकेशन के बाद पीसीआर ट्यूब को न खोलें।