2×HiF Taq प्लस मास्टर मिक्स
कैट नंबर: HCR2014B
HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स (डाई के साथ) एक रेडी-टू-यूज़ 2×प्रीमिक्स्ड समाधान है जिसमें प्लस HIF डीएनए पॉलीमरेज़, dNTPs और अनुकूलित बफर शामिल हैं।कमरे के तापमान पर दो मोनोक्लोनल एंटीबॉडी जो पोलीमरेज़ गतिविधि और 3'→5'एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि को रोकते हैं, आसानी से और अत्यधिक विशिष्ट हॉट स्टार्ट पीसीआर के लिए मास्टर मिश्रण में जोड़े जाते हैं।एंजाइम को लंबी खंड प्रवर्धन क्षमता देने के लिए मास्टर मिश्रण में विस्तार कारक जोड़ा जाता है, प्रवर्धन की लंबाई 13 केबी तक हो सकती है, एंजाइम में 5′→3′ डीएनए पोलीमरेज़ गतिविधि और 3′→5′ है एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि, इसकी निष्ठा टाक डीएनए पोलीमरेज़ की 83 गुना है, जो सामान्य डीएनए पोलीमरेज़ की 9 गुना है।यह जटिल टेम्पलेट्स के प्रवर्धन के लिए उपयुक्त है, प्रवर्धन उत्पाद एक कुंद अंत है।
2×HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स (डाई के साथ) में तेज और आसान, उच्च संवेदनशीलता, मजबूत विशिष्टता, अच्छी स्थिरता आदि के फायदे हैं, प्रतिक्रिया प्रणाली को केवल प्राइमर और टेम्पलेट जोड़ने की आवश्यकता है, और इसे दो द्वारा बढ़ाया जा सकता है- चरण प्रोटोकॉल, प्रयोगात्मक चरणों को सरल बनाना और समय की बचत करना।इस उत्पाद में वैद्युतकणसंचलन संकेतक रंग शामिल हैं, और पीसीआर उत्पादों का उपयोग सीधे वैद्युतकणसंचलन के लिए किया जा सकता है।इसके अलावा, उत्पाद में एक विशिष्ट सुरक्षात्मक एजेंट भी होता है, ताकि मास्टर मिश्रण बार-बार जमने-पिघलने के बाद स्थिर गतिविधि बनाए रख सके।
जमा करने की अवस्था
उत्पादों को 1 वर्ष के लिए -25~-15℃ पर संग्रहित किया जाना चाहिए।
विशेष विवरण
उत्पाद विनिर्देश | मास्टर मिक्स |
एकाग्रता | 2× |
ठोस शुरुआत | बिल्ट-इन हॉट स्टार्ट |
आगे निकलना | कुंद |
प्रतिक्रिया की गति | तेज़ |
आकार (अंतिम उत्पाद) | 13kb तक |
परिवहन के लिए शर्तें | सूखी बर्फ |
उत्पाद का प्रकार | उच्च निष्ठा पीसीआर प्रीमिक्स |
निर्देश
1.पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली
अवयव | आयतन (μL) |
डीएनए टेम्पलेट | उपयुक्त |
फॉरवर्ड प्राइमर (10 μmol/L) | 2.5 |
रिवर्स प्राइमर (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स | 25 |
डीडीएच2O | से 50 |
2.विभिन्न टेम्पलेट्स का अनुशंसित उपयोग
टेम्पलेट का प्रकार | टुकड़ों को 1kb से 10 kb तक बढ़ाएं |
जीनोमिक डीएनए | 50ng-200 एनजी |
प्लाज्मिड या वायरल डीएनए | 10pg-20ng |
सीडीएनए | 1-2.5 µL (अंतिम पीसीआर प्रतिक्रिया मात्रा के 10% से अधिक न हो) |
3.प्रवर्धन प्रोटोकॉल
1) दो-चरणीय प्रोटोकॉल (जटिलता टेम्पलेट)
साइकिल कदम | अस्थायी. | समय | साइकिल |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 98℃ | 3 मिनट | 1 |
विकृतीकरण | 98℃ | 10 सेकंड | 30-35 |
विस्तार | 68℃ | 30 सेकंड/केबी | |
अंतिम विस्तार | 72℃ | 5 मिनट | 1 |
2) थ्री-स्टेप प्रोटोकॉल (नियमित प्रोटोकॉल)
साइकिल कदम | अस्थायी. | समय | साइकिल |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 98℃ | 3 मिनट | 1 |
विकृतीकरण | 98℃ | 10 सेकंड | 30-35 |
एनीलिंग | 60℃ | 20 सेकंड | |
विस्तार | 72℃ | 30 सेकंड/केबी | |
अंतिम विस्तार | 72℃ | 5 मिनट | 1 |
3) एनीलिंग ग्रैडिएंट प्रोटोकॉल (जटिलता टेम्पलेट)
साइकिल कदम | तापमान | समय | साइकिल |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 98℃ | 3 मिनट | 1 |
विकृतीकरण | 98℃ | 10 सेकंड | 15 (प्रति चक्र 1℃ की कमी) |
ग्रेडिएंट एनीलिंग | 70-55℃ | 20 सेकंड | |
विस्तार | 72℃ | 30 सेकंड/केबी | |
विकृतीकरण | 98℃ | 10 सेकंड |
20 |
एनीलिंग | 55℃ | 20 सेकंड | |
विस्तार | 72℃ | 30 सेकंड/केबी | |
अंतिम विस्तार | 72℃ | 5 मिनट | 1 |
विभिन्न प्रवर्धन प्रोटोकॉल के अंतर्गत सुविधाएँ
प्रोटोकोl | दो कदम | तीन चरणों | ग्रेडिएंट एनीलिंग |
विशेष. | तेज़ | मध्यम | धीमा |
विशेषता | उच्च | मध्यम | उच्च |
पीसीआर उपज | मध्यम | उच्च | मध्यम |
पता लगाने की दर | उच्च | मध्यम | उच्च |
टिप्पणियाँ
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