फॉस्फेटस क्षारीय (एएलपी)
विवरण
क्षारीय फॉस्फेट एक पुनः संयोजक ई. कोली स्ट्रेन से प्राप्त होता है जो TAB5 जीन को वहन करता है।एंजाइम डीएनए और आरएनए फॉस्फोमोनोएस्टर के 5´ और 3´ सिरों के डिफॉस्फोराइलेशन को उत्प्रेरित करता है।इसके अलावा, यह राइबोज, साथ ही डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोसाइड ट्राइफॉस्फेट (एनटीपी और डीएनटीपी) को हाइड्रोलाइज करता है।TAB5 क्षारीय फॉस्फेट 5´ उभरे हुए, 5´ धंसे हुए और कुंद सिरों पर कार्य करता है।फॉस्फेटस का उपयोग कई आणविक जीव विज्ञान अनुप्रयोगों में किया जा सकता है, जैसे डीएनए या आरएनए के फॉस्फोराइलेटेड सिरों को हटाने के लिए क्लोनिंग या जांच अंत लेबलिंग।क्लोनिंग प्रयोगों में, डिफॉस्फोराइलेशन रैखिककृत प्लास्मिड डीएनए को स्व-बंधाव से रोकता है।यह डीएनए अनुक्रमण के लिए एक टेम्पलेट तैयार करने के लिए पीसीआर प्रतिक्रियाओं में अनिगमित डीएनटीपी को भी नीचा दिखा सकता है।5 मिनट के लिए 70 डिग्री सेल्सियस पर गर्म करने पर एंजाइम पूरी तरह से और अपरिवर्तनीय रूप से निष्क्रिय हो जाता है, जिससे लिगेशन या अंतिम लेबलिंग से पहले फॉस्फेट को हटाना अनावश्यक हो जाता है।
प्रयोग
1. प्रोटीन (एंटीबॉडी, स्ट्रेप्टाविडिन आदि) से जुड़ा क्षारीय फॉस्फेट विशेष रूप से लक्ष्य अणुओं की पहचान कर सकता है, और इसका उपयोग एलिसा, डब्ल्यूबी और हिस्टोकेमिकल पहचान में किया जा सकता है;
2. स्व-लिंकिंग को रोकने के लिए डीएनए या आरएनए के 5'-टर्मिनल को डीफॉस्फोराइज़ करने के लिए क्षारीय फॉस्फेट का उपयोग किया जा सकता है;
3. उपरोक्त डिफॉस्फोराइलेटेड डीएनए या आरएनए को रेडियो-लेबल फॉस्फेट (टी 4 पॉली-न्यूक्लियोटाइड किनेज के माध्यम से) द्वारा लेबल किया जा सकता है।
रासायनिक संरचना
विनिर्देश
परीक्षण चीज़ें | विशेष विवरण |
एंजाइम गतिविधि | 5यू/μL |
एंडोन्यूक्लिज़ गतिविधि | का पता नहीं चला |
एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि | का पता नहीं चला |
निकिंग गतिविधि | का पता नहीं चला |
RNase गतिविधि | का पता नहीं चला |
ई.कोली डीएनए | ≤1कॉपी/5U |
अन्तर्जीवविष | एलएएल-टेस्ट, ≤10EU/मिलीग्राम |
पवित्रता | ≥95% |
परिवहन एवं भंडारण
परिवहन:परिवेश
भंडारण :2-8°C पर भण्डारित करें
पुन: परीक्षण की अनुशंसा की गईज़िंदगी:2 साल