पेरोक्सीडेज (हॉर्सरैडिश स्रोत) पर्यायवाची: हाइड्रोजन पेरोक्साइड ऑक्सीडोरडक्टेस;एचआरपी
विवरण
हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज (एचआरपी) हॉर्सरैडिश (अमोरेशिया रस्टिकाना) की जड़ों से अलग किया जाता है और पेरोक्सीडेस के फेरोप्रोटोपॉर्फिरिन समूह से संबंधित है।HRP आसानी से हाइड्रोजन पेरोक्साइड (H2O2) के साथ मिल जाता है।परिणामी [HRP-H2O2] कॉम्प्लेक्स विभिन्न प्रकार के हाइड्रोजन दाताओं को ऑक्सीकरण कर सकता है:
दाता + H2O2 → ऑक्सीकृत दाता + 2 H2O
एचआरपी विभिन्न सब्सट्रेट्स को ऑक्सीकरण करेगा (तालिका 1 देखें):
• क्रोमोजेनिक
• केमिलुमिनसेंट (जैसे ल्यूमिनोल या आइसोलुमिनॉल)
• फ्लोरोजेनिक (जैसे टायरामाइन, होमोवैनिलिक एसिड, या 4-हाइड्रॉक्सीफेनिल एसिटिक एसिड)
एचआरपी एक एकल श्रृंखला पॉलीपेप्टाइड है जिसमें चार डाइसल्फ़ाइड पुल होते हैं।एचआरपी एक ग्लाइकोप्रोटीन है जिसमें 18% कार्बोहाइड्रेट होता है।विशिष्ट आइसोजाइम के आधार पर कार्बोहाइड्रेट संरचना में गैलेक्टोज, अरेबिनोज, जाइलोज, फ्यूकोज, मैनोज, मैनोसामाइन और गैलेक्टोसामाइन शामिल होते हैं।
एचआरपी इम्युनोब्लॉटिंग, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और एलिसा सहित कई अलग-अलग इम्यूनोकैमिस्ट्री अनुप्रयोगों में इम्युनोग्लोबुलिन के लिए व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला लेबल है।एचआरपी को कई अलग-अलग तरीकों से एंटीबॉडी से संयुग्मित किया जा सकता है, जिसमें ग्लूटाराल्डिहाइड, आवधिक ऑक्सीकरण, डाइसल्फ़ाइड बॉन्ड के माध्यम से, और अमीनो और थिओल निर्देशित क्रॉस-लिंकर्स के माध्यम से भी शामिल है।एचआरपी एंटीबॉडी के लिए सबसे वांछित लेबल है, क्योंकि यह तीन सबसे लोकप्रिय एंजाइम लेबल (पेरोक्सीडेज, β-गैलेक्टोसिडेज़, क्षारीय फॉस्फेट) में से सबसे छोटा और सबसे स्थिर है और इसके ग्लाइकोसिलेशन से गैर-विशिष्ट बंधन कम हो जाता है।ग्लूटाराल्डिहाइड और आवधिक संयुग्मन विधियों की समीक्षा प्रकाशित की गई है।
पेरोक्सीडेज का उपयोग घोल में ग्लूकोज4 और पेरोक्साइड के निर्धारण के लिए भी किया जाता है।कई प्रकाशनों, 6-24 थीसिस, 25-29 और शोध प्रबंध 30-46 ने अपने शोध प्रोटोकॉल में पी8375 के उपयोग का हवाला दिया है।
रासायनिक संरचना
विनिर्देश
परीक्षण चीज़ें | विशेष विवरण |
विवरण | लाल-भूरा अनाकार पाउडर, लियोफिलाइज्ड |
गतिविधि | ≥100U/मिलीग्राम |
शुद्धता(एसडीएस-पेज) | ≥90% |
घुलनशीलता (10 मिलीग्राम पाउडर/एमएल) | स्पष्ट |
एंजाइमों को दूषित करना | |
एनएडीएच/एनएडीपीएच ऑक्सीडेज | ≤0.1% |
केटालेज़ | ≤0.005% |
ATPase के सक्रियण | ≤0.03% |
परिवहन एवं भंडारण
परिवहन:2-8°C के तहत भेजा गया
भंडारण:-20°C (दीर्घकालिक), 2-8°C (अल्पावधि) पर स्टोर करें
पुन: परीक्षण की अनुशंसा की गईज़िंदगी:2 साल