एक कदम तेज़ आरटी-क्यूपीसीआर जांच प्रीमिक्स-यूएनजी
कैट नं: HCR5143A
वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर जांच किट (फास्ट के लिए) एक जांच-आधारित आरटी-क्यूपीसीआर फास्ट डिटेक्शन किट है जो आरएनए को टेम्पलेट (जैसे आरएनए वायरस) के रूप में उपयोग करके सिंगल-प्लेक्स या मल्टीप्लेक्स मात्रात्मक पीसीआर के लिए उपयुक्त है।यह उत्पाद तेजी से प्रवर्धन के लिए अनुकूलित बफर के साथ एंटीबॉडी-संशोधित टैक डीएनए पॉलीमरेज़ और एक-चरण समर्पित रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस की एक नई पीढ़ी का उपयोग करता है, जिसमें तेज प्रवर्धन गति, उच्च प्रवर्धन दक्षता और विशिष्टता है।यह कम समय में कम और उच्च सांद्रता वाले नमूनों के सिंगल-प्लेक्स और मल्टीप्लेक्स दोनों में संतुलित प्रवर्धन का समर्थन करता है।
अवयव
1. 5×आरटी-क्यूपीसीआर बफर (यू+)
2. एंजाइम मिश्रण (यू+)
टिप्पणियाँ:
एक।5×आरटी-क्यूपीसीआर बफर (यू+) में डीएनटीपी और एमजी शामिल हैं2+;
बी।एंजाइम मिश्रण (यू+) में रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस, हॉट स्टार्ट टैक डीएनए पोलीमरेज़, आरएनसे अवरोधक और यूडीजी शामिल हैं;
सी।RNase-मुक्त टिप्स, EP ट्यूब आदि का उपयोग करें।
उपयोग से पहले, 5×RT-qपीसीआर बफर (U+) को अच्छी तरह से मिलाएं।यदि पिघलने के बाद कोई वर्षा होती है, तो बफर के कमरे के तापमान पर लौटने, मिश्रित होने और घुलने की प्रतीक्षा करें, और फिर उन्हें सामान्य रूप से उपयोग करें।
जमा करने की अवस्था
उत्पाद को सूखी बर्फ के साथ भेजा जाता है और इसे 1 वर्ष के लिए -25~-15℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है।
निर्देश
1. प्रतिक्रिया प्रणाली
अवयव | वॉल्यूम (20 μL प्रतिक्रिया) |
2 ×आरटी-क्यूपीसीआर बफर | 4μL |
एंजाइम मिश्रण (यू+) | 0.8μL |
प्राइमर फॉरवर्ड | 0.1~ 1.0μM |
प्राइमर रिवर्स | 0.1~ 1.0μM |
तक्मान जांच | 0.05~0.25μM |
खाका | एक्स μL |
RNase-मुक्त पानी | 25μL तक |
टिप्पणियाँ: प्रतिक्रिया की मात्रा 10-50μL है।
2. साइक्लिंग प्रोटोकॉल (एसमानक)
चक्र कदम | अस्थायी. | समय | साइकिल |
रिवर्स प्रतिलेखन | 55 ℃ | दस मिनट | 1 |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 95 ℃ | 30 सेकंड | 1 |
विकृतीकरण | 95 ℃ | 10 सेकंड | 45 |
एनीलिंग/विस्तार | 60 ℃ | 30 सेकंड |
साइकिलिंग प्रोटोकॉल (तेज़) चक्र कदम |
अस्थायी. |
समय |
साइकिल |
रिवर्स प्रतिलेखन | 55 ℃ | 5 मिनट | 1 |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 95 ℃ | 5 एस | 1 |
विकृतीकरण | 95 ℃ | 3 एस | 43 |
एनीलिंग/विस्तार | 60 ℃ | 10 एस |
टिप्पणियाँ:
एक।रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन तापमान 50 ℃ से 60 ℃ के बीच है, तापमान बढ़ने से जटिल संरचनाओं और उच्च सीजी सामग्री टेम्पलेट्स को बढ़ाने में मदद मिलती है;
बी।इष्टतम एनीलिंग तापमान को प्राइमर के टीएम मान के आधार पर समायोजित करने की आवश्यकता है, और वास्तविक समय पीसीआर उपकरण के आधार पर प्रतिदीप्ति सिग्नल संग्रह के लिए सबसे कम समय का चयन करें।
टिप्पणियाँ
कृपया अपने स्वास्थ्य और सुरक्षा को सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक पीपीई, जैसे लैब कोट और दस्ताने पहनें!