बीएसटी 2.0 डीएनए पोलीमरेज़ (ग्लिसरॉल मुक्त, उच्च घनत्व)
बीएसटी डीएनए पोलीमरेज़ V2 बैसिलस स्टीयरोथर्मोफिलस डीएनए पोलीमरेज़ I से प्राप्त होता है, जिसमें 5′→3′ डीएनए पोलीमरेज़ गतिविधि और मजबूत श्रृंखला प्रतिस्थापन गतिविधि होती है, लेकिन कोई 5′→3′ एक्सोन्यूक्लिज़ गतिविधि नहीं होती है।बीएसटी डीएनए पॉलीमरेज़ वी2 स्ट्रैंड-विस्थापन, इज़ोटेर्मल एम्प्लीफिकेशन लैंप (लूप मीडिएटेड इज़ोथर्मल एम्प्लीफिकेशन) और रैपिड सीक्वेंसिंग के लिए आदर्श रूप से उपयुक्त है।यह बीएसटी डीएनए पोलीमरेज़ वी2 कमरे के तापमान पर डीएनए पोलीमरेज़ गतिविधि को बाधित करने में सक्षम है, ताकि इसे संचालित किया जा सके और प्रतिक्रिया प्रणाली को कमरे के तापमान पर तैयार किया जा सके, गैर-विशिष्ट प्रवर्धन को रोका जा सके और प्रतिक्रिया की दक्षता में सुधार किया जा सके, और यह संस्करण कर सकता है लियोफिलाइज़्ड होना।इसके अलावा, यह ऊंचे तापमान पर अपनी गतिविधि जारी करने में सक्षम है, इस प्रकार एक अलग सक्रियण चरण की आवश्यकता समाप्त हो जाती है।
अवयव
| अवयव | एचसी5007A-01 | एचसी5007A-02 | एचसी5007A-03 |
| बीएसटी डीएनए पोलीमरेज़ वी2 (ग्लिसरॉल-मुक्त) (32यू/μL) | 0.05 एमएल | 0.25 एमएल | 2.5 एमएल |
| 10×एचसी बीएसटी वी2 बफर | 1.5 एमएल | 2×1.5 एमएल | 3×10 एमएल |
| एमजीएसओ4 (100एमएम) | 1.5 एमएल | 2×1.5 एमएल | 2×10 एमएल |
अनुप्रयोग
1.लैंप इज़ोटेर्मल प्रवर्धन
2.डीएनए स्ट्रैंड एकल विस्थापन प्रतिक्रिया
3.उच्च जीसी जीन अनुक्रमण
4.नैनोग्राम स्तर का डीएनए अनुक्रमण।
गोदाम की स्थिति
0°C के तहत परिवहन और -25°C~-15°C पर भंडारण किया जाए।
इकाई परिभाषा
एक इकाई को एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है जो 65 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट में एसिड अघुलनशील सामग्री में 25 एनएमओएल डीएनटीपी को शामिल करता है।
लैंप प्रतिक्रिया
| अवयव | 25 μLप्रणाली |
| 10×एचसी बीएसटी वी2 बफर | 2.5 μL |
| एमजीएसओ4 (100एमएम) | 1.5 μL |
| dNTPs (प्रत्येक 10mM) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 हरा (25×)a | 1.0 μL |
| प्राइमर मिश्रणb | 6 μL |
| बीएसटी डीएनए पोलीमरेज़ वी2 (ग्लिसरॉल-मुक्त) (32 यू/यूएल) | 0.25 μL |
| खाका | × μL |
| ddH₂O | 25 μL तक |
टिप्पणियाँ:
1)ए.SYTOTM 16 हरा (25×): प्रायोगिक आवश्यकताओं के अनुसार, अन्य रंगों को विकल्प के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है;
2) बी.प्राइमर मिश्रण: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB और अन्य मात्राओं को मिलाकर प्राप्त किया जाता है।
प्रतिक्रिया एवं स्थिति
1 × HC Bst V2 बफर, ऊष्मायन तापमान 60°C और 65°C के बीच है।
ताप निष्क्रियता
80°सेल्सियस, 20 मिनट।
