बीएसएआई प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिएज
विवरण
BsaI प्रतिबंध एंजाइम एक प्रकार II प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ है जो E.coli द्वारा व्यक्त बैसिलस स्पैरिकस में BspQI जीन द्वारा एन्कोडेड पुनः संयोजक प्रोटीन से प्राप्त होता है।प्रतिबंध एंडोन्यूक्लाइजेस का व्यापक रूप से जीन मैपिंग, क्लोनिंग और अन्य क्षेत्रों में उपयोग किया जाता है।यह एंजाइम कुशल जीन रेखीयकरण Bsa I, IIs प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ के लिए तेजी से डीएनए को काटता है, एक पुनः संयोजक ई। कोलाई स्ट्रेन से प्राप्त होता है जो बेसिलस स्टीरोथर्मोफिलस से क्लोन और संशोधित BsaI जीन को वहन करता है।जिनकी विशिष्टता देशी एंजाइमों और घटी हुई तारा गतिविधि के समान है।इसकी पहचान क्रम और दरार स्थल इस प्रकार हैं:
5'······जीजीटीसीटीसी(एन)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)·····5'
रासायनिक संरचना
उत्पाद की विशेषताएँ
• रेस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज में उच्च एंजाइमेटिक गतिविधि होती है और यह पाचन प्रतिक्रिया को जल्दी पूरा करता है।
• सटीक "स्केलपेल" काटने को सुनिश्चित करने के लिए कम गैर-विशिष्ट एंडोन्यूक्लिज़ गतिविधि।
• कोई बीएसए प्रणाली नहीं, गर्मी स्रोत प्रदूषण को कम करता है।
विनिर्देश
परीक्षण चीज़ें | विशेष विवरण |
एंजाइम गतिविधि | 20 यू/µ एल |
शुद्धता (एसडीएस-पेज) | ≥95% |
रनसे | किसी का पता नहीं चला |
गैर-विशिष्ट DNase गतिविधि | पता नहीं चला |
स्टार गतिविधि | पता नहीं चला |
लिगेशन और रिकटिंग | पाचन के बाद, डीएनए के टुकड़े लिगेट किए जा सकते हैं।और इन ligated अंशों को Bsal के साथ फिर से काटा जा सकता है। |
एंडोटॉक्सिन (एलएएल-परीक्षण) | ≤10 ईयू/मिलीग्राम |
ई कोलाई डीएनए | ≤1 प्रति/2U |
गुणवत्ता नियंत्रण
शुद्धता ≥ 95%, कोई DNase, RNase गतिविधि, होस्ट डीएनए अवशेष ≤ 100pg/mg, होस्ट प्रोटीन अवशेष ≤ -50ppm, एंडोटॉक्सिन अवशेष ≤ 10EU/mg, कोई प्रोटीज गतिविधि नहीं, बाँझ, माइकोप्लाज्मा से मुक्त
आवेदन
पाली (ए/टी/सी/जी) के अंत में एक रैखिक डीएनए टुकड़ा तैयार करने के लिए प्लाज्मिड को डाइजेस्ट करें;
इन विट्रो ट्रांसक्रिप्शन से पहले प्लाज्मिड टेम्पलेट को रेखीय बनाएं;
प्रतिबंध डाइजेस्ट;
इकाई परिभाषा
एक इकाई को 50 μL की कुल प्रतिक्रिया मात्रा में 37 डिग्री सेल्सियस पर 1 घंटे में आंतरिक नियंत्रण डीएनए के 1 μg को पचाने के लिए आवश्यक एंजाइम की मात्रा के रूप में परिभाषित किया गया है।
परिवहन और भंडारण
यातायात:-15 डिग्री सेल्सियस के तहत भेज दिया
भंडारण:-25~-15°C पर स्टोर करें
अनुशंसित पुन: परीक्षण जीवन:1 वर्ष